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液相色譜柱的柱長(zhǎng)及內(nèi)徑的選擇要點(diǎn)分享

更新時(shí)間:2022-08-18   點(diǎn)擊次數(shù):1269次
  液相色譜柱在使用前,要進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。
 
  液相色譜柱的柱長(zhǎng)及內(nèi)徑的選擇:
 
  長(zhǎng)度的選擇:柱越長(zhǎng),總柱效越高(n值越大),柱越長(zhǎng),分析時(shí)間也越長(zhǎng)。250—300mm是普遍的柱長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子,一般用來(lái)分離l0到50個(gè)組份的中等至復(fù)雜混合物;500—600mm,要求較高分辨率的應(yīng)用,—般用來(lái)分離大于50個(gè)組份或包含有難分離物質(zhì)的復(fù)雜樣品程序升溫分析。
 
  內(nèi)徑:柱效率與柱半徑平方成反比,內(nèi)徑越小柱效越高,但內(nèi)徑越大,柱容量也增加,允許進(jìn)樣量就越多。當(dāng)進(jìn)樣量超過(guò)柱容量時(shí),則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡,將會(huì)導(dǎo)致色譜蜂畸變,柱分辨率降低,重現(xiàn)性不好。因此對(duì)于復(fù)雜樣品需要準(zhǔn)確分離,必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子,目前實(shí)驗(yàn)室使用常見(jiàn)的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
 
  一般選擇原則:分析大分子量化合物選擇大孔徑;對(duì)于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,以改善峰形,延長(zhǎng)使用壽命等。
 
  現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目,根據(jù)參數(shù)可以給我們提供一個(gè)初步的選擇,但由于各個(gè)儀器廠商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異,即使都是C18柱,同一品牌不同系列都有不同的功能,有能耐受低pH值的、有耐高溫的、有適合堿性樣品的等等。所以在選擇前要好好研究參數(shù),仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),才能找到合適的色譜柱和適宜的分離方法。
 

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